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PCR反應陰性對照擴增有信號分析
日期：2025-06-16 17:49
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摘要：
對照擴增有信號排查各操作環(huán)節(jié)是否有不當,造成交叉污染分析：
1、引物設計不夠優(yōu)化。應避免引物二聚體和發(fā)夾結構的出現。
2、引物濃度不佳。適當降低引物濃度,并注意上下游引物的濃度配比。
3、鎂離子濃度過高。適當降低鎂離子濃度,或選擇更適合的mix試劑盒。
4、模板有基因組的污染。RNA提取過程中避免基因組DNA的引入,或通過引物設計避免非特異性擴增。
5、交叉污染。在所用的試劑中有交叉污染, 或操...
對照擴增有信號排查各操作環(huán)節(jié)是否有不當,造成交叉污染分析：
1、引物設計不夠優(yōu)化。應避免引物二聚體和發(fā)夾結構的出現。
2、引物濃度不佳。適當降低引物濃度,并注意上下游引物的濃度配比。
3、鎂離子濃度過高。適當降低鎂離子濃度,或選擇更適合的mix試劑盒。
4、模板有基因組的污染。RNA提取過程中避免基因組DNA的引入,或通過引物設計避免非特異性擴增。
5、交叉污染。在所用的試劑中有交叉污染, 或操作環(huán)境中有氣溶膠造成污染, 建議對操作環(huán)境進行處理, 或者更換新的環(huán)境、加樣器、槍頭以及所有的引物、試劑等。