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選擇合適一抗需要確定因素
日期：2025-06-16 18:13
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摘要：實驗室科研工作離不開抗體，WB、IP、IHC、IF、ChIP和FC都需要用到抗體，那科研實驗室如何選擇合適的抗體呢？
實驗室科研工作離不開抗體，WB、IP、IHC、IF、ChIP和FC都需要用到抗體，那科研實驗室如何選擇合適的抗體呢？一抗可以特異結(jié)合底物，就是識別出我們想要檢測的東西。一抗和底物結(jié)合與否用肉眼是看不出來的。選擇合適一抗需要確定因素:
1、確定抗體的名字。注意中英文名字、它名、亞型等信息。
2、確定你的實驗類型。Elisa，WB，IHC，ICC，還是FACS。一般抗體的說明書都會列出該抗體經(jīng)驗證過適用于何種實驗的類型，如果抗體說明書沒有提及的應用類型，并不意味著該抗體不適用于此種分析應用類型，而僅是說明尚未經(jīng)過此種實驗驗證，請根據(jù)說明書列出的已驗證的類型來選擇適合你實驗的抗體。
3、確定實驗樣本的種屬。Human，Mouse，還是Rat。一般抗體說明書都列出該抗體經(jīng)試驗驗證過適用于何種物種實驗，請根據(jù)說明書列出已驗證的種屬來選擇適合你實驗的抗體。
4、樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)。了解樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)有助于選擇zui 合適的抗體，待測樣本蛋白的結(jié)構(gòu)域和樣本在提取和處理過程中是否會變性，蛋白空間構(gòu)象的改變，會影響抗體的免yi 親和反應。
5、單多克隆抗體的選擇。市面上的抗體還是以多克隆抗體為主，一般單克隆抗體特異性強，但親和力相對小，檢測抗原靈敏度相對就低;而多克隆抗體特異性稍弱，但抗體的親和力強，靈敏度高，但易出現(xiàn)非特異性染色(可以通過封閉等避免)。