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細胞傳代的操作步驟
日期：2025-06-17 00:53
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摘要：細胞傳代的操作步驟
細胞傳代的操作步驟：
1、挑選細胞：鏡檢細胞，挑選生長狀態(tài)良好，細胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。
2、配制細胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-0.2%LH 培養(yǎng)液100ml 內(nèi)，加入滅活小牛血清10m1，慶大霉素溶液0.3m1，7.5%碳酸氫鈉溶液3ml。（僅供一般參考）。
3、消化細胞：先用PBS 洗液沖洗細胞表面1-2 次，每次10m1，棄去洗液，向細胞瓶內(nèi)加入0.25％胰蛋白酶溶液，每瓶1m1，細胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細胞表面。
4、至細胞完全脫落到胰酶中：每瓶加入10m1 細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中，再加入10m1 細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝，然后補加至所需培養(yǎng)量。
5、加塞，置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2～4 天成片(由細胞接種濃度決定)。
6、填寫傳代記錄。