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WB結(jié)果中雜帶較多可能的原因及建議
日期：2025-06-16 19:47
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摘要：
WB結(jié)果中雜帶較多可能的原因及建議：
①目的蛋白存在多個修飾位點(磷酸化位點、糖基化位點等等)，本身可以出現(xiàn)多條帶。查文獻(xiàn)或生物信息學(xué)分析，獲得蛋白序列的修飾位點信息，去除修蛋白飾后確定蛋白實際大小，這個需要一定的生物化學(xué)基礎(chǔ)和生信分析能力。
②目的蛋白有其它剪切本，查閱文獻(xiàn)或生物信息學(xué)分析其可能性。
③樣本處理過程中目的蛋白發(fā)生降解，加入蛋白酶抑制劑；樣本處理在冰上操作。
④上樣量過高，過于敏感，適當(dāng)減少上樣量。
⑤一抗特異性不高，重新選擇或制備高特異性的抗體。
⑥一抗不純，純化抗體。
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WB結(jié)果中雜帶較多可能的原因及建議：
①目的蛋白存在多個修飾位點(磷酸化位點、糖基化位點等等)，本身可以出現(xiàn)多條帶。查文獻(xiàn)或生物信息學(xué)分析，獲得蛋白序列的修飾位點信息，去除修蛋白飾后確定蛋白實際大小，這個需要一定的生物化學(xué)基礎(chǔ)和生信分析能力。
②目的蛋白有其它剪切本，查閱文獻(xiàn)或生物信息學(xué)分析其可能性。
③樣本處理過程中目的蛋白發(fā)生降解，加入蛋白酶抑制劑；樣本處理在冰上操作。
④上樣量過高，過于敏感，適當(dāng)減少上樣量。
⑤一抗特異性不高，重新選擇或制備高特異性的抗體。
⑥一抗不純，純化抗體。
⑦一抗或者二抗?jié)舛绕?，適當(dāng)降低抗體濃度。