介紹幾種二抗探針的優(yōu)缺點(diǎn)及其適用的實(shí)驗(yàn)：

酶：

       主要有兩種不同的酶耦聯(lián)物，HRP和AP。比較而言，前者更經(jīng)濟(jì)、快速、穩(wěn)定，而后者較前者更為靈敏，通常情況下，HRP廣泛應(yīng)用于免yi 組化，western blot和ELISA中，而堿性磷酸酶（AP）更適合于固相的免yi 檢測實(shí)驗(yàn)，如ELISA和western blot.

熒光基團(tuán)：

FITC：FITC是廣泛使用的熒光基團(tuán)，但其*大的缺點(diǎn)是淬滅快，使用抗淬滅劑可以減輕。

AMCA：常用在多標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中，如免yi 熒光、流式細(xì)胞術(shù)。其缺點(diǎn)是，淬滅快，且由于肉眼不能很好的檢測其所激發(fā)的藍(lán)色熒光，因而AMCA耦聯(lián)的二抗更適用于檢測大量存在的抗原。

花青染料（Cy2,Cy3,Cy5）：Cy2比FITC更穩(wěn)定，且在表面熒光顯微鏡下，Cy2的熒光FITC更強(qiáng)。Cy3和Cy5比大多數(shù)熒光基團(tuán)更亮，更穩(wěn)定，背景更弱。二者常在共聚焦顯微實(shí)驗(yàn)中作多標(biāo)記。但Cy5的缺點(diǎn)是不能用表面熒光顯微鏡觀察，因此通常用具有遠(yuǎn)紅外檢測器的共聚焦顯微鏡觀察。

TRITC,RRX,TR：TRITC經(jīng)常和FITC一起用于雙標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中，也可以使用RRX或TR，但TR會(huì)產(chǎn)生較高的背景。在使用裝有氪氫燈的激光共聚焦掃描顯微鏡作三標(biāo)記實(shí)驗(yàn)時(shí)，RRX尤其有用，可以和Cy2（或FITC）及Cy5一起使用，因?yàn)镽RX的發(fā)射波長在Cy2和Cy5中間，且和這兩者的重疊很少。

PE：常和FITC一起用于流式細(xì)胞術(shù)雙標(biāo)記實(shí)驗(yàn)。