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合成cDNA引物的選擇
日期：2025-06-17 00:50
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摘要：
RT-PCR技術原理：提取組織或細胞中的總RNA，以其中的mRNA作為模板，采用Oligo（dT）或隨機引物利用逆轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄成cDNA，再以cDNA為模板進行PCR擴增，從而獲得目的基因或檢測基因表達。以下來了解合成cDNA引物的選擇：
1、 隨機六聚體引物：當特定mRNA由于含有使反轉(zhuǎn)錄酶終止的序列而難于拷貝其全長序列時，可采用隨機六聚體引物這一不特異的引物來拷貝全長mRNA。用此種方法時，體系中所有RNA分子全部充當了cDNA**鏈模板，PCR引物在擴增過程中賦予所需要的特異性。通常用此引物合成的cDNA中96%來源...