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如何長期維持細胞株?

日期:2025-06-17 00:58
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摘要:
細胞株是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。原代培養(yǎng)物經(jīng)**傳代成功后即為細胞系(cell line), 由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代,或傳代次數(shù)有限, 可稱為有限細胞系(finite cell line), 如可以連續(xù)培養(yǎng), 則稱為連續(xù)細胞系(continuous cell line), 培養(yǎng)50代以上并無限培養(yǎng)下去。 所以細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得的具有特殊性質或標志的培養(yǎng)細胞。從培養(yǎng)代數(shù)來講,可培養(yǎng)到40-50代。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。對于人類腫瘤細胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長穩(wěn)定,并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。
給養(yǎng) (給予新鮮的培養(yǎng)基) ,細胞生長過程中會消耗培養(yǎng)基中的某些必需因子,必須更換培養(yǎng)基。
分瓶 (傳代、細胞數(shù)批減少),細胞數(shù)量不斷增長,超出容器和培養(yǎng)基的負荷。(PS: 培養(yǎng)和傳代是同時進行的,很難只進行一個而不進行另一個操作。)
凍存 細胞株都必須分裝凍存樣品??梢宰鳛閭溆茫乐辜毎硇偷钠兓蚴俏廴?。
時刻觀察你的細胞,不要在沒有進行倒置顯微鏡觀察的情況下就進行細胞傳代、細胞實驗或凍存細胞。通過連續(xù)的觀察,你可以在污染沒有成為主要危害前發(fā)現(xiàn)它,還能在細胞形態(tài)發(fā)生變化時知道漂變的產(chǎn)生,還可以決定什么時侯傳代、什么時候進行實驗以及什么時候放棄實驗。